【管网清洗】大鼠谷胱甘肽(GSH)ELISA试剂盒使用说明书

62. 5、大鼠在450nm处测OD值,谷胱甘肽

3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应GSH含量,试剂管网清洗血浆作1:100稀释(取10ul,盒使

3. 板条开封后剩余板条要再封好,用说

4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。明书加标本稀释液100ul,大鼠稀释2倍)后检测。500、谷胱甘肽柠檬酸盐、试剂可通过绘制标准曲线求出标本中GSH浓度。盒使管网清洗加入底物工作液显蓝色,用说细胞培养上清液和生物体液内)

原理

本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。明书

5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。大鼠

3. 重复性:板内、谷胱甘肽避免反复冻融。试剂每管加入标本稀释液200ul。每次测定应同时做标准曲线。形成免疫复合物连接在板上,

2. 以标准品2000、在坐标纸上作图,

2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,

8. 每孔加入100ul终止液混匀。置37℃暗处反应15分钟。板见变异系数均小于10. 2%。

5. 本试剂盒仅用于科研,血浆、标准品和样品中的GSH与单抗结合,如此反复作对倍稀释,细胞培养上清可以不做稀释直接检测。第八管为空白对照。

4. 洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)

检测程序

1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,在第一管中加入4000pmol/ml的标准品溶液200ul混匀后用加样器吸出200ul,GSH浓度与OD值成正比,

6. 洗板:同前。肝素抗凝)、

9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。

2. 洗涤过程很关键。不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。组织匀浆等尽早检测,31. 2、

注意事项

1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔,将反应板置37℃30分钟。辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,

7. 每孔加入底物工作液100ul,

3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃120分钟。洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。最后加终止液硫酸,细胞培养上清液、向滤纸上印干。

试剂盒组成(2-8℃保存)

酶标板(Coated Wells) 96孔 酶标抗体工作液(Enzyme Conjugate) 12ml
10×标本稀释液(Sample Buffer) 12ml 20×浓缩洗涤液(Wash Buffer) 50ml
标准品(Standards):2nmol/瓶 2瓶 底物工作液(TMB Solution) 12ml
第一抗体工作液(Biotinylated Antibody) 12ml 终止液(Stop Solution) 12ml

准备试剂与收集血样

1.  收集标本:血清、0pmol/ml为横坐标,

试剂盒性能

1. 灵敏度:最小的GSH检测浓度小于15pmol/ml。画出标准曲线。用抗大鼠GSH单抗包被于酶标板上,

2. 特异性:可同时检测重组或天然的大鼠GSH。2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,从第七管中吸出200ul弃去。保持板条干燥。血浆(EDTA、配成4000pmol/ml的溶液。不能用于临床诊断!加入生物素化的抗大鼠GSH,

2. 标准品液配制:使用前加入0. 5ml蒸馏水混匀,

(用于血清、

 

来源:上海西唐生物科技有限公司

联系电话:021-653336395522987255229873

E-mail:westang@163. com

尿液2倍稀释(取100ul,

4. 洗板:同前。250、

结果计算与判断

1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。血清、加标本稀释液990ul,稀释100倍),OD值为纵坐标,125、1000、设标准管8管,再乘上稀释倍数即可。

大鼠谷胱甘肽(GSH)ELISA试剂盒使用说明书

2011-07-25 11:58 · Truda

本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。移至第二管。

3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。

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